Acute hydrogen sulfide exposure in post-smolt Atlantic salmon(Salmo salar): Critical levels and recovery  

后幼鮭期大西洋鮭(Salmo salar)急性硫化氫暴露:臨界水平與恢復(fù)  

來(lái)源:Aquaculture, 570 (2023)

《水產(chǎn)養(yǎng)殖》,第570卷(2023年)

 

 

摘要內(nèi)容:  

研究通過(guò)間歇性流通式呼吸測(cè)量法,評(píng)估了急性硫化氫(H?S)暴露對(duì)大西洋鮭代謝的影響。實(shí)驗(yàn)將三組不同體重(100-500克)的鮭魚(yú)暴露于漸進(jìn)增加的H?S濃度(0.53±0.14 μM/h),直至耗氧率(MO?)低于標(biāo)準(zhǔn)代謝率(SMR)或失去平衡(LOE),此時(shí)定義為臨界H?S濃度(H?Scrit)。暴露后,魚(yú)類(lèi)在無(wú)H?S水中恢復(fù),以測(cè)定過(guò)量耗氧量(EOC)。結(jié)果表明,大西洋鮭對(duì)H?S的耐受性低于此前預(yù)期,平均H?Scrit為1.78±0.39 μM,且與體型無(wú)關(guān)。恢復(fù)階段的EOC顯著高于累積氧虧(DO?),小型鮭的EOC更大,表明暴露后更易受其他脅迫影響。  

 

研究目的:  

確定大西洋鮭急性H?S暴露的臨界濃度(H?Scrit)及其對(duì)代謝的抑制機(jī)制。  

 

量化暴露后的恢復(fù)過(guò)程(EOC),評(píng)估不同體型鮭魚(yú)的恢復(fù)能力差異。  

 

為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)提供H?S安全閾值數(shù)據(jù),以制定防控策略。  

 

研究思路:  

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):  

 

三組鮭魚(yú)(小型:103.3±21.0克,中型:275.3±26.3克,大型:550.2±39.3克)置于呼吸測(cè)量系統(tǒng)中(圖1)。  

 

 

24小時(shí)適應(yīng)期測(cè)定SMR和最大耗氧率(MO?max)。  

 

H?S線性遞增暴露(0.53±0.14 μM/h)直至達(dá)到H?Scrit(MO?<SMR或LOE),隨后切換至無(wú)H?S水恢復(fù)。  

參數(shù)測(cè)量:  

 

實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)H?S濃度(Unisense微電極)、MO?、溫度、pH。  

 

計(jì)算SMR、MO?max、有氧代謝范圍(AS)、累積氧虧(DO?)、恢復(fù)期過(guò)量耗氧量(EOC)及恢復(fù)時(shí)間。  

數(shù)據(jù)分析:  

 

比較不同體型組的H?Scrit、EOC、DO?差異(ANOVA檢驗(yàn))。  

 

測(cè)量的數(shù)據(jù)及研究意義(注明來(lái)源圖表):  

代謝基礎(chǔ)參數(shù)(表1):  

 

 

SMR、MO?max、AS:反映魚(yú)類(lèi)基礎(chǔ)代謝能力。小型與大型鮭SMR較高(P<0.05),但AS無(wú)組間差異,表明體型不影響最大有氧代謝潛力。  

H?Scrit(表1,圖3):  

 

 

所有組平均H?Scrit為1.78±0.39 μM(60.7±13.2 μg/L),無(wú)體型差異(P=0.786)。意義:首次明確大西洋鮭H?S耐受閾值遠(yuǎn)低于既往報(bào)道(如金魚(yú)3.5 μM),解釋養(yǎng)殖中突發(fā)死亡現(xiàn)象。  

暴露響應(yīng)模式(圖3):  

 

26%個(gè)體因LOE終止暴露(未顯示MO?下降),其余因MO?<SMR。MO?響應(yīng)分兩類(lèi):H?S遞增期MO?升高(B、C)或不變(A、D)。意義:個(gè)體代謝響應(yīng)異質(zhì)性顯著,預(yù)警系統(tǒng)需依賴(lài)直接H?S監(jiān)測(cè)而非統(tǒng)一行為指標(biāo)。  

恢復(fù)參數(shù)(表2,圖4):  

 

 

MO?peak:恢復(fù)期峰值耗氧率,小型鮭比中型高48%(P<0.05),反映其代謝紊亂更嚴(yán)重。  

 

DO?:暴露期累積氧虧,組間無(wú)差異(P=0.547)。  

 

EOC:恢復(fù)期過(guò)量耗氧量,小型鮭(405.7±176.3 mg O?/kg/h)顯著高于中、大型(P=0.016),表明小型鮭需更多能量清除代謝副產(chǎn)物。  

 

EOC > DO?:所有組EOC遠(yuǎn)超DO?(如小型鮭差40倍),揭示H?S抑制線粒體功能導(dǎo)致的"隱性代謝代價(jià)"。  

 

結(jié)論:  

大西洋鮭H?Scrit為1.78±0.39 μM,獨(dú)立于體型,但遠(yuǎn)低于多數(shù)魚(yú)類(lèi)(如金魚(yú)3.5 μM),解釋養(yǎng)殖RAS系統(tǒng)突發(fā)死亡。  

 

H?S暴露引發(fā)兩類(lèi)代謝響應(yīng):MO?升高或不變,26%個(gè)體因LOE終止,提示個(gè)體異質(zhì)性限制行為預(yù)警可行性。  

 

恢復(fù)期EOC顯著高于DO?,小型鮭EOC更大,暴露后更脆弱,需更多氧債償還。  

 

丹麥Unisense電極數(shù)據(jù)的詳細(xì)研究意義:  

高精度實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)(圖1, 3):  

 

電極每分鐘記錄H?S濃度(pH/T校正),9點(diǎn)校準(zhǔn)(R2>0.99),確保暴露濃度的準(zhǔn)確性(0.53±0.14 μM/h線性遞增)。  

 

反饋系統(tǒng)聯(lián)動(dòng)蠕動(dòng)泵(圖1),動(dòng)態(tài)維持目標(biāo)H?S,克服H?S氧化損失問(wèn)題(半衰期<3小時(shí))。  

臨界閾值界定:  

 

實(shí)時(shí)H?S數(shù)據(jù)與MO?同步(圖3),精準(zhǔn)定位H?Scrit(MO?<SMR或LOE時(shí)刻),避免傳統(tǒng)靜態(tài)暴露的濃度高估。  

毒理機(jī)制解析:  

 

H?S濃度-時(shí)間曲線(圖3)揭示暴露時(shí)長(zhǎng)(平均206.6分鐘)與代謝抑制的關(guān)聯(lián),證實(shí)H?S通過(guò)抑制細(xì)胞色素c氧化酶(COX)阻遏有氧代謝。  

養(yǎng)殖應(yīng)用價(jià)值:  

 

實(shí)測(cè)閾值(1.78 μM)為RAS系統(tǒng)H?S預(yù)警提供依據(jù),強(qiáng)調(diào)需實(shí)時(shí)傳感器(因個(gè)體響應(yīng)差異大),而非行為監(jiān)測(cè)。